免疫细胞的分离技术都有哪些

免疫细胞是指参与免疫应答或与免疫应答相关的细胞。包括淋巴细胞、树突状细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞、肥大细胞等。免疫细胞才能分为多种，在**中各种免疫细胞担任着严重的角色。今日作者就给大家介绍一下它的分离技能都有哪些。

1、淋巴细胞的分离

取肝素抗凝血1m1 加Hanks 液1m1 稀释后，沿管壁徐徐滴流叠加盛有2m1 淋巴细胞分离液的试管内(注意勿与分离液混合，然后2000r/min 水平离心20min，管内分为4 层，自上而下依次为血浆，单个核细胞，颗粒白细胞、红细胞。用毛细管伸至单个核细胞层中(位于细胞分离液与血浆的界面上)，沿管壁轻轻吸出全部细胞。然后用Hanks 液洗两次，每次2000r/min 离心10min，最后用RPMI l640 培养液将细胞配成2×106/m1 的细胞悬液备用。

2、T 细胞及B 细胞的分离

将淋巴细胞悬液经过尼龙棉柱，B 细胞粘附于尼龙棉上，T细胞则不粘附，先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱，流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞，并用少量的RPMI l640 培基洗脱，此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱(塑料管)的长短和尼龙棉的多少，视分离细胞的多少而定。

3、单核巨噬细胞的分离

单核巨噬细胞有粘附塑料或玻璃外表的特性，而淋巴细胞则无此特性，借此可将这两类细胞分开，其妙招简述如下。将待分离的细胞悬液(如实物动物的腹腔液)加入适当尺寸的塑料或玻璃平皿内，置于37℃ C02 温箱内温育1 小时，然后用RPMI 1640 培基轻轻漂洗平皿外表，移除非粘附细胞，再将粘附有细胞的平皿外表用上述培基轻轻洗刷，收集粘附的单核巨噬细胞。假如要得到纯度较高的单核巨噬细胞，可反复上述过程。

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